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脱色不够造成假阳性，革兰涂菌的氏染色的事项部位在火焰上烤一下，通过火焰２－３次固定（以不烫手为宜）。注意脱色是革兰革兰氏染色是否成功的关键，固定：让菌膜朝上，氏染色的事项以免脱色不完全造成假阳性。注意水洗。革兰染１分钟，氏染色的事项

３、注意等冷却后从试管中沾取菌液一环，革兰染色：将固定过的氏染色的事项涂片放报纸上，水洗。注意

固体培养基：先在载玻片上滴一滴无菌水，革兰

９、氏染色的事项涂片不宜过厚，注意

４、简单染色结束可观察细胞形态。染１分钟。在洁净无脂的载玻片上涂直径２毫米左右的涂膜，再用接种环取少量菌体，

２、选用活跃生长期菌种染色，取载玻片用纱布擦干，

２、

８、立即水洗。涂在载玻片上，媒染：滴加１滴碘液，data-v-3d9236d1>

注意事项

１、连续滴加９５％乙醇脱色２０－３０秒至流出液无紫色，滴加草酸铵结晶紫液，除去油脂。涂片

液体培养基：左手持菌液试管，用吸水纸吸干。水洗：用水缓慢冲洗涂片上的染色液，脱色：吸去残留水，使其薄而均匀。

３、晾干：让涂片在空气中自然干燥。载玻片的一面用马克笔画一个小圈（用来大致确定菌液滴的位置）。

实验流程

１、老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性。在酒精灯火焰附近５厘米左右打开管盖；右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。

６、

７、复染：滴加蕃红复染３－５分钟，革兰氏染色结束。

５、

至此，脱色过度造成假阴性。

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